Effects of atelectatic areas on the surrounding lung tissue during mechanical ventilation in an experimental model of acute lung injury induced by lipopolysaccharide / Efeitos das áreas atelectásicas no tecido pulmonar circundante durante a ventilação mecânica em um modelo experimental de lesão pulmonar aguda induzida por lipopolissacarídeo

ABSTRACT Objective: To assess the effect of atelectasis during mechanical ventilation on the periatelectatic and normal lung regions in a model of atelectasis in rats with acute lung injury induced by lipopolysaccharide. Methods: Twenty-four rats were randomized into the following four groups, each with 6 animals: the Saline-Control Group, Lipopolysaccharide Control Group, Saline-Atelectasis Group, and Lipopolysaccharide Atelectasis Group. Acute lung injury was induced by intraperitoneal injection of lipopolysaccharide. After 24 hours, atelectasis was induced by bronchial blocking. The animals underwent mechanical ventilation for two hours with protective parameters, and respiratory mechanics were monitored during this period. Thereafter, histologic analyses of two regions of interest, periatelectatic areas and the normally-aerated lung contralateral to the atelectatic areas, were performed. Results: The lung injury score was significantly higher in the Lipopolysaccharide Control Group (0.41 ± 0.13) than in the Saline Control Group (0.15 ± 0.51), p < 0.05. Periatelectatic regions showed higher lung injury scores than normally-aerated regions in both the Saline-Atelectasis (0.44 ± 0.06 x 0.27 ± 0.74 p < 0.05) and Lipopolysaccharide Atelectasis (0.56 ± 0.09 x 0.35 ± 0.04 p < 0.05) Groups. The lung injury score in the periatelectatic regions was higher in the Lipopolysaccharide Atelectasis Group (0.56 ± 0.09) than in the periatelectatic region of the Saline-Atelectasis Group (0.44 ± 0.06), p < 0.05. Conclusion: Atelectasis may cause injury to the surrounding tissue after a period of mechanical ventilation with protective parameters. Its effect was more significant in previously injured lungs.

RESUMO Objetivo: Avaliar o efeito da atelectasia durante a ventilação mecânica nas regiões periatelectáticas e pulmonares normais em um modelo de atelectasia em ratos com lesão pulmonar aguda induzida por lipopolissacarídeo. Métodos: Foram distribuídos aleatoriamente 24 ratos em quatro grupos, cada um com 6 animais: Grupo Salina-Controle, Grupo Lipopolissacarídeo-Controle, Grupo Salina-Atelectasia e Grupo Lipopolissacarídeo-Atelectasia. A lesão pulmonar aguda foi induzida por injeção intraperitoneal de lipopolissacarídeo. Após 24 horas, a atelectasia foi induzida por bloqueio brônquico. Os animais foram submetidos à ventilação mecânica por 2 horas com parâmetros ventilatórios protetores, e a mecânica respiratória foi monitorada durante esse período. Em seguida, foram realizadas análises histológicas de duas regiões de interesse: as áreas periatelectásicas e o pulmão normalmente aerado contralateral às áreas atelectásicas. Resultados: O escore de lesão pulmonar foi significativamente maior no Grupo Controle-Lipopolissacarídeo (0,41 ± 0,13) do que no Grupo Controle-Solução Salina (0,15 ± 0,51), com p < 0,05. As regiões periatelectásicas apresentaram escores maiores de lesão pulmonar do que as regiões normalmente aeradas nos Grupos Atelectasia-Solução Salina (0,44 ± 0,06 versus 0,27 ± 0,74, p < 0,05) e Atelectasia-Lipopolissacarídeo (0,56 ± 0,09 versus 0,35 ± 0,04, p < 0,05). O escore de lesão pulmonar nas regiões periatelectásicas foi maior no Grupo Atelectasia-Lipopolissacarídeo (0,56 ± 0,09) do que na região periatelectásica do Grupo Atelectasia-Solução Salina (0,44 ± 0,06), p < 0,05. Conclusão: A atelectasia pode causar lesão no tecido circundante após um período de ventilação mecânica com parâmetros ventilatórios protetores. Seu efeito foi mais significativo em pulmões previamente lesionados.

Modelos pré-clínicos de câncer hepático / Preclinical models of liver câncer

ABSTRACT Background: This manuscript provides an overview of liver carcinogenesis in murine models of hepatocellular carcinoma (HCC) and cholangiocarcinoma (CCA). Objective: A review through MEDLINE and EMBASE was performed to assess articles until August 2022. Methods: Search was conducted of the entire electronic databases and the keywords used was HCC, CCA, carcinogenesis, animal models and liver. Articles exclusion was based on the lack of close relation to the subject. Carcinogenesis models of HCC include HCC induced by senescence in transgenic animals, HCC diet-induced, HCC induced by chemotoxicagents, xenograft, oncogenes, and HCC in transgenic animals inoculated with B and C virus. The models of CCA include the use of dimethylnitrosamine (DMN), diethylnitrosamine (DEN), thioacetamide (TAA), and carbon tetrachloride (CCl4). CCA murine models may also be induced by: CCA cells, genetic manipulation, Smad4, PTEN and p53 knockout, xenograft, and DEN-left median bile duct ligation. Results: In this review, we described different murine models of carcinogenesis that reproduce the key points for HCC and CCA genesis allowing a better understanding of its genetic, physiopathological, and environmental abnormalities. Conclusion: Each model has its advantages, disadvantages, similarities, and differences with the corresponding human disease and should be chosen according to the specificity of the study. Ultimately, those models can also be used for testing new anticancer therapeutic approaches.

RESUMO Contexto: Este manuscrito fornece uma visão geral da carcinogênese hepática em modelos murinos de carcinoma hepatocelular (CHC) e colangiocarcinoma (CCA). Objetivo: Realizar uma revisão de artigos científicos até agosto de 2022 utilizando as bases de dados MEDLINE e EMBASE. Métodos: A busca foi realizada em todas as bases de dados eletrônicas e as palavras-chave usadas foram CHC, CCA, carcinogenesis, modelos animais e fígado. A exclusão dos artigos baseou-se na falta de estreita relação com o assunto. Os modelos de carcinogênese do CHC incluíram: CHC induzido por senescência em animais transgênicos, CHC induzido por dieta, CHC induzido por agentes quimiotóxicos, xenoenxerto, oncogenes e CHC em animais transgênicos inoculados com vírus B e C. Os modelos de CCA incluíram: o uso de dimetilnitrosamina (DMN), dietilnitrosamina (DEN), tioacetamida (TAA) e tetracloreto de carbono (CCl4). Os modelos murinos de CCA induzidos por incluir: células de CCA, manipulação genética, animais nocaute para Smad4, PTEN e p53, xenoenxerto e ligadura do ducto biliar mediano esquerdo. Resultados: Nesta revisão, descrevemos diferentes modelos murinos de carcinogênese que reproduzem os pontos-chave para a gênese do CHC e do CCA, permitindo uma melhor compreensão de suas anormalidades genéticas, fisiopatológicas e ambientais. Conclusão: Cada modelo tem suas vantagens, desvantagens, semelhanças e diferenças com a doença humana correspondente e deve ser escolhido de acordo com a especificidade do estudo. Em última análise, esses modelos também podem ser utilizados para testar novas abordagens terapêuticas anticancerígenas.

Characterization of the Masquelet Induced Membrane Technique in a Murine Segmental Bone Defect Model / Caracterização da membrana induzida pela técnica de Masquelet em modelo murino de defeito ósseo segmentar

Abstract Objective To reproduce in an animal model the surgical technique of Masquelet used in the treatment of critical bone defects and to analyze the characteristics of the membrane formed around the bone cement. Methods A 10mm critical defect was created in the femoral shaft of 21 Sprague-Dawley rats. After resection of the central portion of the diaphysis, the defect was stabilized with a Kirschner wire introduced through the medullary canal and with the interposition of a bone cement spacer. After 2, 4, and 6 weeks of the surgical procedure, the animals were euthanized and evaluated on radiographs of the posterior limb regarding the size of the defect, alignment and stability of the osteosynthesis. The membranes formed around the spacer were subjected to histological analysis to assess thickness, connective tissue maturation and vascular density. Results Over time, the membranes initially made up of loose connective tissue were replaced by membranes represented by dense connective tissue, rich in thick collagen fibers. At six weeks, membrane thickness was greater (565 ± 208μm) than at four (186.9 ± 70.21μm, p = 0.0002) and two weeks (252.2 ± 55.1μm, p = 0.001). All membranes from the initial time showed foci of osteogenic differentiation that progressively reduced over time. Conclusion In addition to the structural and protective function of the membrane, its intrinsic biological characteristics can actively contribute to bone regeneration. The biological activity attributed by the presence of foci of osteogenesis confers to the membrane the potential of osteoinduction that favors the local conditions for the integration of the bone graft.

Resumo Objetivo Reproduzir em modelo animal a técnica cirúrgica de Masquelet utilizada no tratamento de defeitos ósseos críticos e analisar as características da membrana formada em torno do cimento ósseo. Métodos Um defeito crítico de 10mm foi realizado na diáfise femoral de 21 ratos Sprague-Dawley. Após a ressecção da porção central da diáfise o defeito foi estabilizado com fio de Kirschner introduzido pelo canal medular e com a interposição de espaçador de cimento ósseo. Após 2, 4, e 6 semanas do procedimento cirúrgico os animais foram eutanasiados e avaliados em radiografias do membro posterior quanto ao tamanho do defeito, o alinhamento e a estabilidade da osteossíntese. As membranas formadas em torno do espaçador foram submetidas a análise histológica para avaliação da espessura, da maturação do tecido conjuntivo e da densidade vascular. Resultados Ao longo do tempo as membranas inicialmente constituídas por tecido conjuntivo frouxo foram substituídas por membranas representadas por tecido conjuntivo denso, rico em fibras colágenas espessas. Com seis semanas a espessura das membranas foi maior (565 ± 208μm) do que com quatro (186,9 ± 70,21μm, p = 0,0002) e duas semanas (252,2 ± 55,1μm, p = 0,001). Todas as membranas do tempo inicial apresentaram focos de diferenciação osteogênica que reduziram progressivamente ao longo do tempo. Conclusão Além da função estrutural e protetora da membrana, suas características biológicas intrínsecas podem contribuir ativamente para a regeneração óssea. A atividade biológica atribuída pela presença de focos de osteogênese confere à membrana potencial de osteoindução que favorece as condições locais para a integração do enxerto ósseo.

Animal Model Standardization for Studying Avascular Necrosis of the Femoral Head in Legg-Calvé-Perthes Disease / Padronização de modelo animal para o estudo da necrose isquêmica da cabeça femoral na doença de Legg-Calvé-Perthes

Abstract Objective Testing an experimental model for ischemic necrosis of the femoral head in Legg-Calvé-Perthes disease by evaluating gait, imaging and morphohistology. Methods The operation was done in 11 piglets. Necrosis by cerclage in the right femoral neck was induced. Piglets were divided into group A, with 8 animals, euthanizing two in the 2nd, 4th, 6th, and 8th weeks, respectively; and group B, with 2 animals (sham), submitted to the surgical procedure without cerclage of the right femoral neck. The gait classification used was that of Etterlin. The frozen femurs were submitted to digital radiography and computed tomography. The height and width of the epiphysis and epiphysary coefficient were measured at study times. Light microscopy and immunohistochemistry with TGF-β1 were performed. Results One animal died of sepsis in Group A. In this group, claudication was observed in all animals. On digital radiography and computed tomography, bone sclerosis, enlargement of the right femoral neck, flattening, collapse, and fragmentation of the right femoral head were observed. All epiphysis height and epiphysary coefficient values of the right femoral head were lower than the contralateral ones, in which were observed chondrocytes disordered and separated by gaps. A reduction in TGF-β1 expression was observed at 2 and 6 weeks in the right femoral head and at eight in the left. In group B, there were no signs of necrosis and gait was normal. Conclusions The model presented reproduced macroscopic necrosis on digital radiography, computed tomography, and microscopy. Gait evaluation showed a good correlation with other ischemia findings. Level of EvidenceV. Diagnostic studies.

Resumo Objetivo Testar um modelo experimental para necrose isquêmica da cabeça femoral na doença de Legg-Calvé-Perthes avaliando a marcha, exames de imagens e morfohistologia. Métodos Operaram-se 11 leitões. Induziu-se a necrose por cerclagem no colo femoral direito. Dividiram-se os leitões em grupo A com 8 animais, sacrificando-se dois na 2ª, 4ª, 6ª e 8ª semanas, respectivamente; e grupo B, com 2 animais (sham), submetidos ao procedimento cirúrgico sem a cerclagem do colo femoral direito. A classificação da marcha utilizada foi a de Etterlin. Os fêmures congelados foram submetidos à radiografia digital e tomografia computadorizada. Mediram-se a altura e largura da epífise e o coeficiente epifisário nos tempos de estudo. Realizou-se, microscopia de luz e imunohistoquímica com TGF-β1. Resultados Um animal morreu por sepse no grupo A. Neste grupo, observou-se claudicação em todos os animais. Na radiografia digital e tomografia computadorizada observaram-se: esclerose óssea, alargamento do colo femoral direito, achatamento, colapso e fragmentação da cabeça femoral direita. Todos os valores da altura da epífise e coeficiente epifisário da cabeça femoral direita foram menores que os contralaterais, nos quais observaram-se condrócitos desordenados e separados por lacunas. Observou-se redução da expressão do TGF-β1 com 2 e 6 semanas nas cabeças femorais direitas e nas esquerdas com oito. No grupo B, não ocorreram sinais de necrose e a marcha foi normal. Conclusões O modelo apresentado reproduziu a necrose macroscopicamente, na radiografia digital, tomografia computadorizada e microscopia. A avaliação da marcha demonstrou boa correlação com os demais achados de isquemia. Nível de EvidênciaV. Estudos diagnósticos.

Anti-inflammatory strategies for hepatic encephalopathy: preclinical studies / Estratégias anti-inflamatórias para encefalopatia hepática: estudos pré-clínicos

Abstract Hepatic encephalopathy (HE) is a potentially reversible neuropsychiatric syndrome. Often, HE causes cognitive and motor dysfunctions due to an acute or chronic insufficiency of the liver or a shunting between the hepatic portal vein and systemic vasculature. Liver damage induces peripheral changes, such as in the metabolism and peripheral inflammatory responses that trigger exacerbated neuroinflammation. In experimental models, anti-inflammatory strategies have demonstrated neuroprotective effects, leading to a reduction in HE-related cognitive and motor impairments. In this scenario, a growing body of evidence has shown that peripheral and central nervous system inflammation are promising preclinical targets. In this review, we performed an overview of FDA-approved drugs and natural compounds which are used in the treatment of other neurological and nonneurological diseases that have played a neuroprotective role in experimental HE, at least in part, through anti-inflammatory mechanisms. Despite the exciting results from animal models, the available data should be critically interpreted, highlighting the importance of translating the findings for clinical essays.

Resumo A encefalopatia hepática (EH) é uma síndrome neuropsiquiátrica potencialmente reversível. Muitas vezes a EH causa disfunções cognitivas e motoras devido à insuficiência do fígado ou por um desvio entre a veia porta hepática e a vasculatura sistêmica. O dano no fígado provoca alterações periféricas, como no metabolismo e nas respostas inflamatórias periféricas, que desencadeiam uma neuroinflamação exacerbada. Em modelos experimentais, estratégias anti-inflamatórias têm demonstrado efeitos neuroprotetores, levando a uma redução dos prejuízos cognitivos e motores relacionados à EH. Neste cenário, evidências crescentes têm mostrado a inflamação periférica e no sistema nervoso central como um promissor alvo pré-clínico. Nesta revisão, abordamos uma visão geral de drogas e compostos naturais aprovados pelo FDA para o uso no tratamento de outras doenças neurológicas e não neurológicas, que tiveram papel neuroprotetor na EH experimental, pelo menos em parte, através de mecanismos anti-inflamatórios. Apesar dos resultados empolgantes em modelos animais, os dados avaliados devem ser criticamente interpretados, destacando a importância da tradução dos achados para ensaios clínicos.

Impacto do treinamento físico no perfil inflamatório e redox renal no desenvolvimento de síndrome metabólica / Impact of exercise training on inflammatory and redox renal profiles in metabolic syndrome development

Objetivo: Investigar o efeito do treinamento físico aeróbio (TF) no perfil inflamatório e de estresse oxidativo renal em modelo experimental de desenvolvimento de síndrome metabólica (SM). Métodos: Ratos Wistar e espontaneamente hipertensos (SHR) distribuídos nos grupos: controle (C), hipertenso (H), hipertenso frutose (HF) e hipertenso frutose treinado (HFT). Os grupos HF e HFT foram submetidos à sobrecarga de frutose (10%, 60 dias) desde o desmame. O TF foi realizado em esteira por 60 dias (5dias/semana, 40-60% velocidade máxima do teste de esforço). Resultados: O TF promoveu redução de ânion superóxido, peróxido de hidrogênio e proteínas oxidadas comparado ao grupo HF. Além disso, o grupo HFT apresentou aumento de FRAP e nitritos comparado aos grupos H e HF. No perfil inflamatório, o TF proporcionou aumento de IL-10 e redução da razão TNFα/IL-10. Conclusão: Os resultados demostraram que o treinamento aeróbio atenuou o estresse oxidativo e favoreceu um perfil anti-inflamatório no tecido renal em um modelo de desenvolvimento de SM.

Objective: To investigate the effect of aerobic exercise training (ET) on renal inflammatory and oxidative stress profiles in an experimental model of metabolic syndrome (MS) development. Methods: Wistar and spontaneously hypertensive (SHR) rats were distributed into control (C), hypertensive (H), hypertensive fructose (HF) and trained hypertensive fructose (THF) groups. The HF and THF groups were submitted to fructose overload (10%, 60 days) since weaning. The ET was performed on a treadmill for 60 days (5 days/week, 40-60% maximum speed of the exercise test). Results: The ET promoted reduction in renal superoxide anion, hydrogen peroxide and oxidized proteins compared to the HF group. In addition, the THF group showed an increase in FRAP and in nitrites compared to the H and HF groups. In the inflammatory profile, ET provided an increase in IL-10 and a reduction in TNFα/IL-10 ratio. Conclusion: The results showed that aerobic training attenuated oxidative stress and favored an anti-inflammatory profile in renal tissue in a model of MS development.

Acute and chronic changes in porcine rete mirabile after embolization with the Menox system: angiographic and histopathological analyses / Alterações angiográficas e histopatológicas agudas e crônicas da rete mirabile no modelo suíno com sistema embólico líquido Menox

Abstract Objective: To evaluate acute and chronic changes seen on angiographic and histopathological studies of porcine rete mirabile, comparing those treated with the Menox liquid embolic system (LES) and those treated with the Onyx LES. Materials and Methods: Five pigs, each weighing approximately 35 kg, were submitted to rete mirabile embolization under general anesthesia and fluoroscopic guidance, with the Menox LES or Onyx LES. Four animals were treated with the Menox LES and underwent cerebral angiography, followed by euthanasia, at 1, 30, 60, and 90 days after embolization. One animal was treated with the Onyx LES underwent the same procedures at 30 days after embolization. In a subsequent histopathological analysis, we compared the Menox LES and Onyx LES in terms of the acute and chronic changes observed. Results: We observed no significant changes in blood pressure, heart rate, or electrocardiographic parameters that could be attributed to the super-selective infusion of dimethyl sulfoxide or the Menox embolic agent. Fluoroscopy showed adequate material opacity, appropriate progression to the center of the rete mirabile and complete unilateral embolization. Microcatheters were uneventfully detached from the embolized nidus. We observed mild to moderate intravascular and extravascular inflammatory responses, without histological evidence of necrotizing arteritis. There were no adverse neurovascular events. Conclusion: The Menox LES appears to be safe and effective, as well as being apparently equivalent to the Onyx LES in terms of the postprocedure angiographic and histopathological findings.

Resumo Objetivo: Avaliar as alterações angiográficas e histopatológicas agudas e crônicas em rete mirabile suína tratadas com o Menox liquid embolic system (LES) e comparar essas alterações com a embolização com Onyx LES. Materiais e Métodos: A embolização da rete mirabile com Menox LES e Onyx LES foi realizada em cinco suínos pesando cerca de 35 kg sob anestesia geral e orientação fluoroscópica. Quatro animais tratados com Menox LES foram submetidos a angiografia cerebral seguida de eutanásia após 1, 30, 60 e 90 dias e um animal tratado com Onix LES foi submetido ao mesmo procedimento após 30 dias. A análise histopatológica subsequente para alterações agudas e crônicas avaliou o desempenho do Menox LES comparado ao Onyx LES. Resultados: Não foram observadas alterações significativas atribuíveis à infusão superseletiva de dimetilsulfóxido ou Menox nos parâmetros de pressão arterial, frequência cardíaca ou eletrocardiograma. A fluoroscopia mostrou opacidade adequada do material, progressão adequada para o centro da rete mirabile e embolização unilateral completa. Os microcateteres foram retirados do nidus embolizado sem complicações. Observou-se resposta inflamatória intravascular e extravascular leve a moderada, sem indício histológico de arterite necrosante. Nenhum dos casos apresentou eventos neurovasculares adversos. Conclusão: A injeção de Menox LES mostrou-se segura e eficaz, além de ser equivalente ao Onyx LES em relação aos achados angiográficos e histopatológicos pós-procedimento.

Visual sensor-based observation and image analysis of muscle injuries in athletes / Observação e análise de imagem baseada em sensores visuais das lesões musculares em atletas / Observación y análisis de imágenes basado en sensores visuales de lesiones musculares en deportistas

ABSTRACT Introduction: Athletes and fitness enthusiasts often suffer muscle injuries during their training. These injuries can worsen when not treated properly, generating an accumulation of severe tissue damage, preventing optimal physical performance, and impacting low immunity. Despite a large number of researches on muscle injuries, its vast majority is limited to the pathological perspective, and there are few studies related to the specific impact of the body sport muscle injury index. Objective: Analyze the body-specific indicators of sports injury to prevent further damage to its practitioners. Methods: Laser scanning confocal electron microscopy is the main observation tool in studying muscle injury in athletes. In further research, an experimental animal model was established. The test samples were 40 male rats over 12 weeks old, randomly divided into four groups, treadmill exercise, swimming at 8% of the weight, and other sports training items. Results: Through the comparative experiment of three indicators, it is found that muscle damage has a widespread impact on the whole body, particularly on blood serum indicators. The period of one hour after injury is considered to have the most impact. However, the symptoms subside after 24 hours. Conclusion: As the main observation tool in this experiment, the microscope showed its good prospect of application in the field of biomedicine. Level of evidence II; Therapeutic studies - investigation of treatment outcomes.

RESUMO Introdução: Atletas e entusiastas adeptos ao condicionamento físico frequentemente sofrem lesões musculares durante seus treinamentos. Essas lesões podem se agravar quando não tratadas adequadamente, gerando um acúmulo de danos teciduais graves, impedindo o desempenho físico ideal e impactando na baixa imunidade. Apesar do grande número de pesquisas sobre lesões musculares, sua vasta maioria é limitada à perspectiva patológica e há poucos estudos relacionados ao impacto específico do índice de lesão muscular esportivo corporal. Objetivo: Analisar os indicadores específicos corporais da lesão esportiva dedicados a evitar maiores danos em seus praticantes. Métodos: A microscopia eletrônica confocal de varredura a laser é a principal ferramenta de observação no estudo da lesão muscular em atletas. Nas pesquisas adicionais, um modelo animal experimental foi estabelecido. As amostras de teste eram 40 ratos machos com mais de 12 semanas de idade, divididos aleatoriamente em quatro grupos, incluiu-se o exercício em esteira, natação com 8% do peso e outros itens de treinamento esportivo. Resultados: Através da experiência comparativa de três indicadores, constata-se que o dano muscular tem um impacto generalizado sobre todo corpo, particularmente nos indicadores do soro sanguíneo. O período de uma hora após a lesão é considerado como o mais impactante. No entanto, os sintomas diminuem após 24 horas. Conclusão: Como principal ferramenta de observação neste experimento, o microscópio mostrou sua boa perspectiva de aplicação no campo da biomedicina. Nível de evidência II; Estudos terapêuticos - investigação dos resultados do tratamento.

Resumen Introducción: Los deportistas y entusiastas del condicionamiento físico suelen sufrir lesiones musculares durante sus entrenamientos. Estas lesiones pueden empeorar cuando no se tratan adecuadamente, generando una acumulación de daños graves en los tejidos, impidiendo un rendimiento físico óptimo y repercutiendo en la baja inmunidad. A pesar del gran número de investigaciones sobre las lesiones musculares, su gran mayoría se limita a la perspectiva patológica y hay pocos estudios relacionados con el impacto específico del índice de lesiones musculares en el deporte corporal. Objetivo: Analizar los indicadores corporales específicos de las lesiones deportivas dedicadas a prevenir mayores daños a sus practicantes. Métodos: La microscopía electrónica confocal de barrido láser es la principal herramienta de observación en el estudio de las lesiones musculares en los atletas. En otras investigaciones, se estableció un modelo animal experimental. Las muestras de prueba fueron 40 ratas macho de más de 12 semanas de edad, divididas aleatoriamente en cuatro grupos, en los que se incluyó el ejercicio en cinta rodante, la natación con un 8% de peso y otros elementos de entrenamiento deportivo. Resultados: A través del experimento comparativo de tres indicadores, se comprueba que el daño muscular tiene un impacto generalizado en todo el organismo, especialmente en los indicadores del suero sanguíneo. El período de una hora después de la lesión se considera el más impactante. Sin embargo, los síntomas disminuyen después de 24 horas. Conclusión: Como principal herramienta de observación en este experimento, el microscopio mostró sus buenas perspectivas de aplicación en el campo de la biomedicina. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos - investigación de los resultados del tratamiento.

Gastrotomy followed by gastrorrhaphy as a reliable and more physiologic technique for inducing peritoneal adhesion in rats / Gastrotomia seguida de gastrorrafia, uma técnica mais confiável e fisiológica para a indução de aderências peritoneais em ratos

ABSTRACT Objective: this research objective was to develop a new peritoneal adhesion animal model that would lead to adhesions formation in all operated animals, simple and reproducible, associated with maintenance the animal's health. Methods: eighteen adult male Wistar rats (Rattus norvegicus) were randomly distributed into three groups: Control Group (anatomical and clinical parameters), Sham Group (delicate manipulation of the stomach and exposure of the peritoneal cavity to ambient air) and Surgery Group (gastrotomy followed by gastrorrhaphy). The animals were analyzed and classificated macroscopically according to two adhesion classification models and differences between groups were considered significant when p<0.05. Results: the six animals in the control group had no peritoneal adhesions, three of the six animals in the sham group had focal peritoneal adhesions, and all animals in the surgery group (gastrotomy followed by gastrorraphy) had firm peritoneal adhesions. All adhesions found were macroscopically quantified and microscopically confirmed, without carrying out a microscopic classification of the adhesions. Conclusion: the new model developed of gastrotomy followed by gastrorrhaphy, proved to be safe and efficient to induce and study peritoneal adhesions.

RESUMO Objetivo: o objetivo deste estudo foi criar um novo modelo animal de indução de aderências peritoneais capaz de levar à formação de aderências em todos os animais operados, simples e reprodutível, associado a manutenção da saúde dos animais. Métodos: Dezoito ratos machos, adultos, da linhagem Wistar (Rattus norvegicus) foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: Grupo Controle (parâmetro anatômico e clínico), Grupo Sham (manipulação delicada do estômago e exposição de cavidade peritoneal ao ar ambiente) e Grupo Cirurgia (gastrotomia seguida de gastrorrafia). Os animais foram submetidos à análise e classificação macroscópicas, seguindo dois modelos de classificação de aderências. As diferenças entre os grupos foram consideradas estatisticamente significantes se p<0,05. Resultados: os seis animais do grupo controle não apresentavam aderências peritoneais, três dos seis animais do grupo sham apresentavam aderências peritoneais focais e todos os seis animais do grupo cirurgia (gastrotomia seguida de gastrorrafia) apresentavam aderências peritoneais firmes. Todas as aderências encontradas foram quantificadas macroscopicamente e confirmadas microscopicamente, sem a realização de classificação microscópica das aderências. Conclusão: o novo modelo desenvolvido, de gastrotomia seguida de gastrorrafia, mostrou-se seguro e eficiente para induzir e estudar aderências peritoneais.

Terapia adjunta com agentes biológicos na periodontite experimental / Adjunctive therapy with biological agents in experimental periodontitis

A presente dissertação foi dividida em dois estudos. O primeiro estudo teve como objetivo desenvolver uma revisão de literatura de trabalhos pré-clínicos que resumisse o papel de diversos fármacos usados para prevenção e tratamento da doença periodontal experimental e destaca a ação direcionada de todos os fármacos com propriedades antirreabsortivas. Além disso, esta revisão fornece uma avaliação oportuna e crítica para o uso científico racional dos medicamentos antirreabsortivos e imunomoduladores em estudos pré-clínicos, o que ajuda a entender a base para sua aplicação clínica. Pode-se concluir a partir dos achados descritos, que fitoterápicos, suplementação com ômega 3 e probióticos tem ganhado cada vez mais atenção devido às suas atividades moduladoras e antirreabsortivas e a ausência de efeitos colaterais, sendo considerados alternativas promissoras como adjuvantes da raspagem subgengival e alisamento radicular em pacientes suscetíveis. O segundo estudo, objetivou-se realizar uma revisão sistemática sobre os potenciais benefícios de agentes biológicos como adjuvantes no tratamento da periodontite experimental em modelos animais, respondendo a seguinte questão: qual é o potencial protetor dos agentes biológicos contra a reabsorção óssea alveolar durante a progressão da periodontite experimental? Os critérios de elegibilidade dos estudos foram baseados na estratégia PI/ECOS, ou seja, P = periodontite; I/E agentes biológicos; C mesma exposição/intervenção; I = exceto sobre o uso de agentes biológicos; e S = resultados secundários (inflamação). Como resultado, 5236 estudos foram selecionados inicialmente por meio de buscas manuais nas bases de dados incluídas . Após a leitura dos resumos e dos textos e de acordo com os critérios de inclusão, 39 estudos que atenderam aos critérios de inclusão foram incluídos neste estudo. Vinte e três agentes biológicos foram avaliados nos estudos incluídos. A maioria dos estudos utilizou o modelo de ligadura de periodontite experimental (PE) para testar o uso de produtos biológicos como estratégias preventivas ou terapêuticas. As dosagens dos produtos biológicos e os períodos de indução da doença variaram com base no modelo de periodontite utilizado. Como principal resultado de todos os estudos, a perda óssea alveolar pôde ser significativamente inibida com a aplicação de produtos biológicos e a redução de mediadores pró-inflamatórios quando comparados aos controles tratados. Em conclusão, essa revisão sistemática demonstrou que os agentes biológicos possuem efeitos benéficos na redução da perda óssea e na diminuição da inflamação durante a progressão da periodontite em modelos animais. (AU)

This MSc dissertation was divided into two studies. The first study aimed to develop a literature review including preclinical studies summarizing the role of various compounds used for the prevention and treatment of periodontitis and highlights the targeted action of all drugs with antiresorptive properties. In addition, this review provided a timely and critical assessment for the rational scientific use of antiresorptive and immunomodulatory drugs in preclinical studies, which helps to understand the basis for their clinical application. It can be concluded from the findings described, that phytotherapeutics, omega-3 supplementation, and probiotics have gained increasing attention due to their modulating and antiresorptive activities and the absence of side effects, and are considered promising alternatives as adjuvants to subgingival scaling and root planing in susceptible patients. In the second study, the aim was to perform a systematic review on the benefits of biological agents as adjuvants in the treatment of experimental periodontitis in animal models, answering the following question: What is the protective potential of biological agents against alveolar bone resorption during the course of experimental periodontitis progression? The criteria for eligibility of the studies were based in PI/ECOs strategy, as such (P) animal models with periodontitis; (I/E) biological agents with protective potential against bone resorption in periodontitis (prevention) or additional benefit as an adjunctive in the treatment of periodontitis; (C) same intervention/exposition as the intervention group (I), except for the use biological agents; (O) alveolar bone resorption (primary outcomes). Secondary outcomes: periodontal parameters, effectiveness of periodontitis-treatment, and adverse effects; (s) no restriction for study design on primary studies (exclusion criteria: randomized clinical trials, clinical studies, and different types of review studies). Study quality was assessed using Systematic Review Centre for Laboratory Animal Experimentation (SYRCLE) Risk of Bias tool. As a result, 5236 initial results from datasets, registries, and manual searches resulted in 39 suitable studies that met the inclusion criteria. Twenty-three biological agents were evaluated in the included studies. Most studies used the ligation model of experimental periodontitis (EP) to test the use of biologics as preventive or therapeutic strategies. The dosages of the biologics and periods of disease induction varied based on the PE model used. As the main outcome of all studies, alveolar bone loss could be significantly inhibited with the application of biologics and the reduction of pro-inflammatory mediators when compared to treated controls. Taken together, this systematic review demonstrated that biologics have beneficial effects in reducing bone loss and decreasing inflammation during the progression of periodontitis in animal models. (AU)

Evaluation of cerebral hemodynamics by transcranial Doppler ultrasonography and its correlation with intracranial pressure in an animal model of intracranial hypertension / Avaliação da hemodinâmica encefálica utilizando Doppler transcraniano e sua correlação com a pressão intracraniana em um modelo animal de hipertensão intracraniana

ABSTRACT Background: Transcranial Doppler has been tested in the evaluation of cerebral hemodynamics as a non-invasive assessment of intracranial pressure (ICP), but there is controversy in the literature about its actual benefit and usefulness in this situation. Objective: To investigate cerebral blood flow assessed by Doppler technique and correlate with the variations of the ICP in the acute phase of intracranial hypertension in an animal model. Methods: An experimental animal model of intracranial hypertension was used. The experiment consisted of two groups of animals in which intracranial balloons were implanted and inflated with 4 mL (A) and 7 mL (B) for controlled simulation of different volumes of hematoma. The values of ICP and Doppler parameters (systolic [FVs], diastolic [FVd], and mean [FVm] cerebral blood flow velocities and pulsatility index [PI]) were collected during the entire procedure (before and during hematoma simulations and venous hypertonic saline infusion intervention). Comparisons between Doppler parameters and ICP monitoring were performed. Results: Twenty pigs were studied, 10 in group A and 10 in group B. A significant correlation between PI and ICP was obtained, especially shortly after abrupt elevation of ICP. There was no correlation between ICP and FVs, FVd or FVm separately. There was also no significant change in ICP after intravenous infusion of hypertonic saline solution. Conclusions: These results demonstrate the potential of PI as a parameter for the evaluation of patients with suspected ICP elevation.

RESUMO Antecedentes: O Doppler transcraniano (DTC) é uma técnica não invasiva para a avaliação da hemodinâmica cerebral, porém existem controvérsias na literatura sobre sua aplicabilidade preditiva em situações de elevada pressão intracraniana (PIC). Objetivo: Investigar o fluxo sanguíneo cerebral pelo DTC e correlacioná-lo com as variações da PIC na fase aguda da hipertensão intracraniana em modelo animal. Métodos: Dois grupos de animais (suínos) foram submetidos a hipertensão intracraniana secundária à indução de diferentes volumes de hematoma, por meio da insuflação de balão intracraniano controlado com 4 e 7 mL de solução salina fisiológica (grupos A e B, respectivamente). Em seguida, administrou-se infusão venosa de solução salina hipertônica (SSH 3%). Foram coletados os valores dos parâmetros de PIC e DTC (velocidade sistólica [FVs], diastólica [FVd] e média [FVm] do fluxo sanguíneo cerebral), bem como o índice de pulsatilidade (IP). Comparações entre os parâmetros do DTC e o monitoramento da PIC foram realizadas. Resultados: Vinte porcos foram estudados, dez no grupo A e dez no grupo B. Correlação significativa entre IP e PIC foi obtida, principalmente logo após a elevação abrupta da PIC. Não houve correlação entre PIC e FVs, FVd ou FVm separadamente. Também não houve alteração significativa na PIC após a infusão de SSH. Conclusões: Esses resultados demonstram o potencial do IP como um bom parâmetro para a avaliação de pacientes com suspeita de elevação da PIC.

Clamp vascular de fio de mononylon em microcirurgia experimental / Vascular clamp of mononylon thread in experimental microsurgery

Introdução: A microcirurgia reparadora é ramo hoje indissociável e imprescindível na cirurgia plástica. O treinamento é longo, custo financeiro relativamente alto e exige muito dos proponentes. Para melhorar essa equação a favor da formação de novos microcirurgiões no Brasil, é fundamental facilitar o acesso ao treinamento experimental, utilizando materiais simples. Huaraca descreveu uma técnica utilizando um simples fio mononylon 5-0 para substituir o clamp vascular, que é instrumento indispensável da anastomose microcirúrgica e geralmente de alto custo. O objetivo é comparar a técnica de Huaraca com fio de mononylon e o clamp metálico tradicional durante anastomose microcirúrgica vascular. Métodos: Seis ratos da raça Wistar cujas duas artérias femorais foram aleatoriamente selecionadas para sutura término-terminal após secção completa, sendo um dos lados realizado com clamp vascular habitual e o contralateral com técnica de Huaraca, no mesmo tempo cirúrgico e pelo mesmo cirurgião. Resultados: Em ambas as situações, a taxa de patência foi de 67% após 72 horas, sendo que o tempo médio foi de 26 minutos com a técnica de Huaraca e de 18 minutos com o clamp tradicional (p=0,001). Conclusão: Apesar do tempo de execução mais longo, a técnica de Huaraca é medida simples e de baixo custo que pode substituir o clamp vascular tradicional.

Introduction: Reconstructive microsurgery is now an inseparable and essential branch of plastic surgery. The training is long, has a relatively high financial cost and requires a lot of the proponents. To improve this equation in favor of the formation of new microsurgeons in Brazil, it is essential to facilitate access to experimental training, using simple materials. Huaraca described a technique using a simple 5-0 mononylon thread to replace the vascular clamp, which is an indispensable instrument for microsurgical anastomosis and is generally expensive. The objective is to compare the Huaraca technique with mononylon thread and the traditional metal clamp during vascular microsurgical anastomosis. Methods: Six Wistar rats whose both femoral arteries were randomly selected for end-to-end suture after complete section, with one side performed with usual vascular clamp and the contralateral with Huaraca technique, at the same surgical time and by the same surgeon. Results: In both situations, the patency rate was 67% after 72 hours, with an average time of 26 minutes with the Huaraca technique and 18 minutes with the traditional clamp (p=0.001). Conclusion: Despite the longer execution time, the Huaraca technique is a simple and low-cost measure that can replace the traditional vascular clamp.

Perspectiva bioética para México, España y Estados Unidos en los modelos in vivo de inducción de daño al ADN

En la actualidad, la investigación biomédica se ha centrado en el estudio de enfermedades como el cáncer, que causan un elevado índice de mortalidad. Existen diferentes modelos animales, empleados para generar diversos tipos de carcinogénesis; el daño directo al ADN es uno de los mecanismos más utilizados. Sin embargo, en la normatividad nacional e internacional vigente, no se señalan los aspectos bioéticos que se deben seguir para desarrollar un modelo experimental de daño al ADN. Además, no se realiza una correcta semejanza de la enfermedad. Debido a lo anterior, esta revisión analiza los avances en cuanto a normatividad que se han generado en diferentes países, comparando los estudios encontrados en Estados Unidos, México y España. La perspectiva a futuro es poder contar con guías de experimentación actualizadas, que permitan pautar las normas necesarias para el adecuado desarrollo de los modelos de investigación animal de daño al ADN y que cumplan con la regla de las 3R en la experimentación animal. Esta iniciativa se debe de realizar en conjunto entre la Organización Mundial de la Salud y los organismos especializados en manejo y cuidado de animales de laboratorio en los ámbitos nacional e internacional.

Currently, biomedical research has focused on the study of diseases such as cancer that causes a high mortality rate. Different animal models are used to generate different types of carcinogenesis; direct DNA damage is one of the most used mechanisms. However, current national and international regulations do not indicate the bioethical aspects that must be followed to develop an experimental model of DNA damage. In addition, they do not perform a correct resemblance of the disease. Due to the above, this review analyzes the advances in regulations generated in different countries, comparing the studies found in the United States, Mexico, and Spain. The future perspective is to be able to count on updated experimentation guidelines, which allow the establishment of the necessary norms for the adequate development of animal research models of DNA damage that comply with the 3R rule in animal experimentation. This initiative should be carried out jointly by the World Health Organization and organizations specialized in managing and caring laboratory animals at the national and international levels.

Na atualidade, a pesquisa biomédica vem se focando no estudo de doenças que causam um elevado índice de mortalidade, como o câncer. Existem diferentes modelos animais utilizados para gerar diversos tipos de carcinogêneses; o dano direto ao DNA é um dos mecanismos mais utilizados. Contudo, na legislação nacional e internacional vigente, não são sinalizados os aspectos bioéticos que devem ser seguidos para desenvolver um modelo experimental de dano ao DNA, além de não ser realizada uma correta semelhança da doença. Devido a isso, esta revisão analisa o avanço quanto à legislação que vem sendo gerada em diferentes países, comparando os estudos encontrados nos Estados Unidos, no México e na Espanha. A perspectiva para o futuro é poder contar com atualizadas, que permitam estabelecer as normas necessárias para desenvolver os modelos de pesquisa animal de dano ao DNA e que cumpram com a regra das 3R na experimentação animal. Essa iniciativa se deve realizar em conjunto entre a Organização Mundial da Saúde e as organizações especializadas na gestão e cuidado de animais de laboratório nos contextos nacional e internacional.

Preliminary study of rabbits as an animal model of mammalian eye transplantation and literature review / Estudo preliminar de coelhos como modelo animal para transplante de olho em mamíferos e revisão da literatura

ABSTRACT Purpose: To describe an innovative animal model of eye transplantation used in rabbits. Methods: six Dutch-belted male rabbits were submitted to lateral orbitotomy in the right eye, wide retrobulbar anatomy exposure, dissection of the structures, identification and distal section of the optic nerve followed by anastomosis either by vicryl (group 1) or fibrin glue (group 2). Electroretinography recording was performed before the section of the optic nerve and every 30 seconds after, to monitor the function of retina. Left eye was used as control group. Results: After optic nerve resection and anastomosis, stable ERG amplitude of the right eye was lost after 302 seconds in group 1 and after 296 seconds on group 2. Left eye kept longer stable ERG amplitude curves. Conclusions: The animal model of whole eye transplantation was effective in describing a novel technique to be used in rabbits, with success of the anatomic procedure. Further studies will clarify the best anastomosis methods and maintenance of function of the receptor organ. Translational relevance: this animal model of whole eye transplantation provides a novel perspective for blind patients and the research models, since we describe a novel mammal animal model. This model can be used as basis of a human model of whole eye transplantation in future studies.

RESUMO Objetivo: Descrever uma técnica cirúrgica inovadora para transplante de olho em um modelo animal em coelhos. Métodos: Seis coelhos machos com Dutch Belted foram submetidos à orbitotomia lateral do olho direito, com ampla exposição da anatomia retrobulbar, dissecção do cone muscular, exposição e secção distal do nervo óptico seguida de anastomose por vicryl (Grupo 1) ou cola de fibrina (Grupo 2). O registro da eletrorretinografia foi realizado antes da secção do nervo óptico e a cada 30 segundos após, para monitorar a função da retina. O olho esquerdo foi usado como grupo controle. Resultados: Após a ressecção do nervo óptico, a estabilidade da amplitude da eletrorretinografia foi perdida no olho direito após 302 segundos no Grupo 1 e após 296 segundos no Grupo 2. O olho esquerdo manteve eletrorretinografia estável por períodos mais longos. Conclusão: O modelo animal de transplante total de olho foi eficaz em descrever uma nova técnica cirúrgica para ser utilizada em laboratório com coelhos, com sucesso do procedimento anatômico. Novos estudos esclarecerão os melhores métodos de anastomose e manutenção da função do órgão receptor.

The round ligament in developmental hip dysplasia: are its mechanical and histological properties preserved? / O ligamento redondo na displasia do desenvolvimento do quadril: suas propriedades mecânicas e histológicas são preservadas?

ABSTRACT Introduction During open surgical dislocated hip reduction, several anatomical structures, such as the round ligament, are approached. However, there is controversy over both the possibility of preserving the ligament and its functional importance. Materials and Methods This experimental study used skeletally immature rabbits as a model for congenital hip dislocation. Thirty-six rabbits comprised the sample that was submitted to the round ligament analysis. The sample was stratified for analysis (biomechanics, zymography, histology, and immunohistochemistry). Statistical analysis compared the unstable side to the control side of each rabbit. Results Biomechanical assays showed that the mean maximal strength of the round ligament on the unstable side was similar to that of the control side (p = 0.594), which was also the case with maximum deformation (p = 0.328). Histologically, there was a statistically significant increase in cellularity on the unstable side (p <0.001). Additionally, there was significantly greater collagen occupancy on the control side (p <0.001). Zymography revealed no significant difference in the amount of active metalloproteinase 2 (MMP-2) (p = 0.068). Conclusions Although histological analysis found evidence of significant changes in the RL in unstable hips, there were no significant differences in zymography, and no changes were observed in biomechanical tests. Evidence Level V; Experimental study.

RESUMO Introdução Durante a redução cirúrgica aberta de luxação de quadril, várias estruturas anatômicas são abordadas, entre elas, o ligamento redondo. No entanto, há controvérsias quanto à possibilidade de preservação desse ligamento, bem como sua importância funcional. Materiais e Métodos Este estudo experimental usou coelhos esqueleticamente imaturos como modelo de luxação congênita do quadril. Trinta e seis coelhos compuseram a amostra que foi submetida à análise do ligamento redondo. A amostra foi estratificada para análise (biomecânica, zimografia, histologia e imuno-histoquímica). A análise estatística comparou o lado instável com o lado controle de cada coelho. Resultados Os ensaios biomecânicos mostraram que a força máxima média do ligamento redondo no lado instável era semelhante ao lado controle (p = 0,594), o que também ocorreu com a deformação máxima (p = 0,328). Em termos histológicos, houve um aumento estatisticamente significante da celularidade no lado instável (p < 0,001). Além disso, houve maior ocupação de colágeno no lado controle (p < 0,001). A zimografia não mostrou diferença significativa da quantidade de metaloproteinase 2 ativa (MMP-2) (p = 0,068). Conclusões Embora a análise histológica tenha encontrado evidências de alterações significativas do LR nos quadris instáveis, não houve diferenças significativas na zimografia e não foram observadas alterações nos testes biomecânicos. Nível de evidência V; Estudo experimental.

Importantes aspectos da nutrição do Zebrafish (Danio rerio) em biotérios

Research carried out with animals has increasingly required the possibility of reproducing the experiments and comparing the results obtained, one of the factors of great importance and influence on the quality of research animals is nutrition. The nutrition of laboratory animals is very relevant when we consider that animals need a diet that meets all their requirements, taking into account that they are in a controlled environment and contained in limited spaces with access only to the diet offered. When in the wild, animals select what to feed on, thus having a varied diet that meets their nutritional needs. An even greater challenge arises when we approach the nutrition of Zebrafish (Danio rerio), as they have a wide possibility of food sources and, being an omnivorous fish, the food sources of this species are very vast and still have few commercial options for food defined formula feeds for research animals. In addition, there is also concern about the interference of this diet correlated with diseases and even the quality of the water where the animals live. This review aims to outline a current overview of Zebrafish nutrition and the need to define rations with a standardized formula in order to improve research results.

As pesquisas realizadas com animais têm requerido cada vez mais a possibilidade de reprodutibilidade dos experimentos e comparação dos resultados obtidos, um dos fatores de grande importância e influência na qualidade dos animais de pesquisa é a nutrição. A nutrição de animais de laboratório é muito relevante ao considerarmos que os animais precisam de uma dieta que supra todas suas exigências, levando em consideração que estes estão num ambiente controlado e contidos em espaços limitados com acesso apenas a dieta ofertada. Quando em vida livre, os animais selecionam com o que se alimentar tendo assim uma dieta variada e que supre suas necessidades nutricionais. Um desafio ainda maior se apresenta ao abordarmos a nutrição de Zebrafish (Danio rerio), pois apresentam uma possibilidade imensa de fontes de alimentos e se tratando de um peixe onívoro, as fontes de alimento dessa espécie é muito vasta e ainda apresenta poucas opções comerciais de rações de fórmula definida para animais de pesquisa. Além disso, existe também a preocupação com a interferência dessa dieta correlacionada a doenças e até mesmo a qualidade da água onde vivem os animais. Esta revisão tem como objetivo traçar um panorama atual sobre a nutrição do Zebrafish e a necessidade de definição de rações com fórmula padronizada visando melhoria dos resultados das pesquisas.

Experimental model study of ischemic necrosis induction of the growing femoral head / Estudo do modelo experimental de indução da necrose isquêmica da cabeça femoral em crescimento

ABSTRACT Many experimental models exist to better understand the necrosis of the femoral head etiology, both in terms of the species variety in which necrosis is induced and in the operative techniques used for treatment. Objective: This study has two main objectives, the first is to review the literature concerning experimental models of avascular necrosis of the growing femoral head, the second, to demonstrate the experimental pig model's reproducibility using a pilot study. Methods: This was a bibliographic review to describe the attempts over time to find the best species and technique for induction that would reproduce ischemic necrosis of the growing femoral head in humans. Simultaneously, a pilot study was performed to verify the replication of induction in pigs, the species that has more similarities with the human hip. The pilot's methodological analysis consists of conventional radiology and verification of possible anatomical, pathological changes. Results: In imaging exams; lateral sub-dislocation of the femur head and triangular appearance of the head were observed, characterizing its flattening; in macroscopic examination, the femoral head flattening with femoral neck widening and shortening was identified; in histology, the proliferation of articular cartilage with the presence of vascular granulation regenerative tissue, with osteoclasts and fibrocartilaginous tissue in the metaphyseal femoral neck region was identified. Conclusion: The experimental pig model can be used as a valuable tool for the reproducibility of anatomical, pathological changes in ischemic necrosis of the growing femoral head. The model is reproducible and feasible and can be beneficial for future studies on the anatomical pathology of necrosis of the growing femoral head. Level of Evidence III, Literature Review .

RESUMO Na tentativa de compreender melhor a etiologia da necrose da cabeça femoral, existe uma diversidade de modelos experimentais tanto no que diz respeito à variedade das espécies em que é induzida a necrose quanto nas técnicas operatórias utilizadas para o tratamento. Objetivo: Este trabalho tem fundamentalmente dois objetivos: a revisão da literatura concernente aos modelos experimentais da necrose avascular da cabeça do fêmur em crescimento e demonstrar a reprodutibilidade do modelo experimental do suíno por meio de um estudo piloto. Métodos: Foi realizada uma revisão bibliográfica descrevendo as tentativas ao longo do tempo em buscar qual seria a melhor espécie e técnica para indução que reproduzisse a necrose isquêmica da cabeça do fêmur em crescimento nos humanos. Simultaneamente foi feito um estudo piloto para verificar a replicação da indução na espécie suína, o espécime cujo quadril tem mais similaridades com o humano. A análise metodológica do piloto consiste na radiologia convencional e verificação das possíveis alterações anátomo patológicas. Resultados: Nos exames por imagem, foram observadas sub-luxação lateral da cabeça do fêmur e aparência triangular da cabeça, caracterizando o achatamento da mesma; no exame macroscópico, identificamos o achatamento da cabeça femoral com alargamento e encurtamento do colo; na histologia, identificamos a proliferação da cartilagem articular com presença de tecido regenerativo vascular de granulação, com osteoclastos e tecido fibrocartilaginoso na região metafisária do colo femoral. Conclusão: Podemos inferir que o modelo experimental suíno pode servir como ferramenta valiosa para a reprodutibilidade das alterações anátomo patológicas da necrose isquêmica da cabeça femoral em crescimento. O modelo é reprodutível e factível, servindo para estudos futuros sobre a anátomo patologia da necrose da cabeça do fêmur em crescimento. Nível de Evidência III, Revisão da Literatura .

Nuocytes from mesenteric lymph node promote allergic responses in a mouse model / Nuócitos de linfonodo mesentérico promovem respostas alérgicas em um modelo de camundongo

Abstract Introduction: Nuocytes play an important role in Type 2 immunity. However, the contribution of ILC2s to allergic rhinitis remains to be clearly elucidated. Objective: To evaluate the role of nuocytes from mesenteric lymph node on allergic responses in mice. Methods: After intraperitoneal administration of interleukin IL-25 and IL-33 to wild-type and Il17br-/-Il1rl1-/- double-deficient mice, nuocytes were purified from the the nasal-associated lymphoid tissue and mesenteric lymph nodes. Then, we assessed productions of IL-5 and IL-13 in nuocytes' cultures. Finally, we adoptively transferred the mesenteric lymph node-derived nuocytes from wild-type and Il17br-/-Il1rl1-/- mice to the murine model of allergic rhinitis to evaluate their roles in nasal allergic responses. Results: We showed that nuocytes in the mesenteric lymph nodes of wild-type mice were upregulated after application of IL-25 and IL-33, and were induced to produce IL-5 and IL-13. Numbers of sneezing and nasal rubbing as well as eosinophils were all enhanced after the adoptive transfer of wild-type nuocytes. Concentrations of IL-5, IL-13, IL-25 and IL-33 in nasal lavage fluid of allergic mice were also increased. However, nuocytes fromIl17br-/-Il1rl1-/- mice did not increase sneezing and nasal rubbing and eosinophilia, and upregulate the above cytokines in the nasal lavage fluid. Conclusion: The findings demonstrate that nuocytes from the mesenteric lymph nodes of wildtype mice promote allergic responses in a mouse model.

Resumo Introdução: Os nuócitos desempenham um papel importante na imunidade do tipo 2. No entanto, a contribuição das interleucinas ILC2s na rinite alérgica ainda precisa ser elucidada. Objetivo: Avaliar o papel dos nuócitos de linfonodos mesentéricos nas respostas alérgicas em camundongos. Método: Após a administração intraperitoneal de interleucina (IL)-25 e IL-33 em camundongos do tipo selvagem e camundongos Il17br-/-Il1rl1-/- com deficiência dupla, os nuócitos foram purificados do tecido linfoide associado a mucosa nasal e linfonodos mesentéricos. Em seguida, avaliamos as produções de IL-5 e IL-13 em culturas de nuócitos. Finalmente, transferimos adotivamente os nuócitos derivados de linfonodos mesentéricos de camundongos do tipo selvagem e camundongos Il17br-/-Il1rl1-/- para o modelo murino de rinite alérgica para avaliar seu papel nas respostas alérgicas nasais. Resultados: Mostramos que os nuócitos nos linfonodos mesentéricos de camundongos do tipo selvagem estavam up-regulados após a aplicação de IL-25 e IL-33 e foram induzidos a produzir IL-5 e IL-13. Os espirros e friçcão nasal, bem como os eosinófilos, aumentaram após a transferência adotiva de nuócitos do tipo selvagem. As concentrações de IL-5, IL-13, IL-25 e IL-33 no líquido da lavagem nasal de camundongos alérgicos também estavam aumentadas. Entretanto, os nuócitos de camundongos Il17br-/-Il1rl1-/- não aumentaram os espirros e a friçcão nasal ou eosinofilia e up-regularam as citocinas acima no líquido de lavagem nasal. Conclusão: Os achados demonstram que os nuócitos dos linfonodos mesentéricos de camundongos selvagens promovem respostas alérgicas em um modelo de camundongo.

New proposal for the treatment of coronal split fractures in lumbar vertebrae: the fatigue curve / Nova proposta de tratamento de fraturas do tipo split coronal em vértebras lombares: curva de fadiga / Nueva propuesta de tratamiento de fracturas del tipo split coronal en vértebras lumbares: curva de fatiga

ABSTRACT Objective: To evaluate a new treatment for split fractures through fatigue tests on a swine model. Methods: Thirty lumbar spine samples (L2-L3-L4) from swine models were divided into three test groups. The first was the control group (intact vertebrae). In the second group, a bone defect was created, similar to a coronal split fracture of the vertebral body. For this, a bone defect (osteotomy) was performed in the coronal axis of the middle third of the middle lumbar vertebral body (L3), keeping the disc-ligament structures intact. In the third group, the same procedure was performed to cause bone failure, but was associated with the use of synthesis material, with pedicular fixation using 3.5 mm cannulated screws with partial thread, in order to apply compression at the fracture site, giving resistance and support to the vertebra. The groups were submitted to biomechanical fatigue tests. The number of cycles required to failure in the specimen was analyzed. Results: The use of the synthesis material increased the resistance of the fractured vertebrae to levels equal to those of the intact vertebra for low cycles with loads of 40% of the failure load, possibly losing up to 20% of their resistance for higher cycles. Conclusions: In the vertebrae in which synthetic material was used, greater resistance to a greater number of cycles for a longer period of time was observed when compared with the fractured vertebrae, suggesting that this is an interesting method for the fixation of split-type spinal fractures. Level of evidence III; Experimental Study.

RESUMO Objetivo: Avaliar um novo tratamento de fraturas do tipo separação (split) através de ensaios de fadiga em modelo suíno. Métodos: Trinta amostras de coluna lombar (L2-L3-L4) de modelos suínos foram divididas em três grupos para testes. O primeiro constituiu o grupo controle (vértebras intactas). No segundo grupo, foi criado um defeito ósseo semelhante a uma fratura split coronal do corpo vertebral. Para tanto, criou-se um defeito ósseo (osteotomia) no eixo coronal do terço médio do corpo vertebral intermediário lombar (L3), mantendo as estruturas disco-ligamentares íntegras. No terceiro grupo, foi realizado o mesmo procedimento para causar a falha óssea, sendo associado o uso de material de síntese, com a fixação pedicular com parafuso canulado de 3,5 mm com rosca parcial, com objetivo de realizar compressão no foco da fratura e dar resistência e sustentação à vertebra. Os grupos foram submetidos a testes biomecânicos de fadiga. Foi analisado o número de ciclos necessários para que ocorresse a falha no corpo de prova. Resultados: O material de síntese aumenta a resistência da vértebra fraturada em níveis iguais aos da vértebra intacta para baixos ciclos e com cargas de 40% da tensão de ruptura, podendo perder até 20% de sua resistência para ciclos mais altos. Conclusões: Nas vértebras em que foi utilizado material de síntese observou-se maior resistência ao maior número de ciclos por um período mais prolongado em comparação com as vértebras apenas fraturadas, sugerindo que este é um método interessante para a fixação de fraturas do tipo split na coluna vertebral. Nível de evidência III; Estudo experimental.

RESUMEN Objetivo: Evaluar un nuevo tratamiento de fracturas lumbares del tipo separación (split) a través de ensayos de fatiga en modelo porcino. Métodos: Treinta muestras de columna lumbar (L2-L3-L4) de modelos porcinos fueron divididas en tres grupos para tests. El primero constituyó el grupo control (vértebras intactas). En el segundo grupo, fue creado un defecto óseo semejante a una fractura split coronal del cuerpo vertebral. Para tanto, se creó un defecto óseo (osteotomía) en el eje coronal del tercio medio del cuerpo vertebral intermedio lumbar (L3), manteniendo las estructuras disco-ligamentarias íntegras. En el tercer grupo, fue realizado el mismo procedimiento para causar la falla ósea, siendo asociado el uso de material de síntesis, con fijación pedicular con tornillo canulado de 3,5 mm con rosca parcial, con el objetivo de realizar compresión en el foco de la fractura y dar resistencia y sustentación a la vértebra. Los grupos fueron sometidos a tests biomecánicos de fatiga. Fue analizado el número de ciclos necesarios para que ocurriese la falla en el cuerpo de prueba. Resultados: El material de síntesis aumenta la resistencia de la vértebra fracturada en niveles iguales a los de la vértebra intacta para bajos ciclos y con cargas de 40% de la tensión de ruptura, pudiendo perder hasta 20% de su resistencia para ciclos más altos. Conclusiones: En las vértebras en que fue utilizado material de síntesis se observó mayor resistencia al mayor número de ciclos por un período más prolongado en comparación con las vértebras solamente fracturadas, sugiriendo que este es un método interesante para la fijación de fracturas de tipo split en columna vertebral. Nivel de evidencia III; Estudio experimental.

Mus musculus: biomodelo de expresión de Desyodinasa (DIO3) y Transtiretina (TTR) en el desarrollo placentario / Mus musculus: an experimental model for Deiodinase (DIO3) and Transthyretin (TTR) expression during placental development / Mus musculus: Biomodelo de expressão de Deiodinase (DIO3) e Transtiretina (TTR) no desenvolvimento da placenta

RESUMEN Introducción: El correcto funcionamiento del eje hipotálamo-hipófisis-tiroides es indispensable para el crecimiento y desarrollo embrionario-fetal, al intervenir en la diferenciación de los tejidos, el desarrollo cerebral y somático, la maduración ósea y la regulación del metabolismo. El paso de las hormonas tiroideas maternas al feto a través de la placenta depende de transportadores transmembrana, enzimas desyodinasas (DIO2 y DIO3) y proteínas transportadoras (TTR). Objetivo: Identificar las zonas de expresión de DIO3 y TTR en la placenta de ratón Mus musculus E10.5, E12.5, E14.5. Métodos: La estructura placentaria y expresión de DIO3 y TTR fueron evaluadas con técnicas histoquímicas e inmunofluorescencia. Resultados: Desde E10.5 se encontraron las tres zonas placentarias, laberinto, zona de unión y decidua. En E12.5 se observó la conformación placentaria definitiva. DIO3 y TTR fueron detectadas en los tres estadios, con predominio en la zona del laberinto. Conclusión: DIO3 y TTR se expresan a lo largo del establecimiento y maduración de la placenta de ratón. El biomodelo murino es una herramienta útil para el estudio del transporte placentario de hormonas tiroideas desde la circulación materna a la fetal.

ABSTRACT Introduction: Correct functioning of hypothalamic-pituitary-thyroid axis is essential for embryonic-fetal growth and development, as it is involved in tissue differentiation, brain and somatic development, bone maturation and metabolic regulation. Maternal thyroid hormones passage to the fetus through the placenta depends on transmembrane transporters, deiodinase enzymes (DIO2 and DIO3) and carrier proteins (TTR). Objective: Identify DIO3 and TTR expression within placental layers of Mus musculus E10.5, E12.5 and E14.5. Methods: Placental structure, DIO3 and TTR expression were evaluated using histochemistry and immunofluorescence techniques. Results: We found that the three placental layers, labyrinth zone, junctional zone, and decidua were present since E10.5. At E12.5 placental final conformation was observed. DIO3 and TTR were detected in the three stages with a predominance in the labyrinth. Conclusion: DIO3 and TTR are expressed throughout the establishment and maturation of mouse placenta. Mice are a useful tool for studying how thyroid hormones are transported from maternal t° fetal circulation at the placenta.

RESUMO Introdução: O correto funcionamento do eixo hipotálamo-hipófise-tireoide é essencial para o crescimento e desenvolvimento embrionário-fetal, pois intervém na diferenciação dos tecidos, desenvolvimento cerebral e somático, maturação óssea e regulaçãodo metabolismo. A passagem dos hormônios tireoidianos maternos para o feto através da placenta depende de transportadores transmembranas, enzimas deiodinase (DIO2 e DIO3) e proteínas transportadoras (TTR). Objetivo: Identificar as zonas de expressão de DIO3 e TTR na placenta de rato Mus musculus E10.5, E12.5, E14.5. Métodos: A estrutura placentária e a expressão de DIO3 e TTR foram avaliadas com técnicas histoquímicas e imunofluorescência. Resultados: De E10.5 as três zonas placentárias, labirinto, zona de união e decídua foram encontradas. Em E12.5 a conformação definitiva da placenta foi observada. O DIO3 e o TTR foram detectados nas três fases, com predomínio na área do labirinto. Conclusão: DIO3 e TTR são expressos ao longo do estabelecimento e maturação da placenta de rato O biomodelo murino é uma ferramenta útil para o estudo do transporte placentário dos hormônios tireoidianos da circulação materna para a fetal.